UBIsuper高灵敏度核酸富集试剂盒

货号：us312  

规格：10~25人份

保存：室温或4℃长期保存

一．产品描述

UBIsuper高灵敏度核酸富集试剂盒是一款专门从血浆，血清、尿液，组织液等样本中，提取含量低的核酸（DNA/RNA）的试剂盒。该试剂盒提取的核酸可以用于多种下游操作，包括测序，各种PCR扩增等。

二．检测样本数 10~25人份，根据样本体积。

三．试剂盒组成

试剂名称	体积	保存条件
纳米磁珠（磁珠） Magnetic Nanoparticles	0.5 ml	4℃或室温
样本裂解液 Samper Lysis Solution	3ml	4℃或室温
核酸结合液 Binding Solution	20ml	4℃或室温
洗涤液 Wash Solution	18mL （需加24mL无水乙醇）	4℃或室温
二次洗涤液 2nd Wash Solution	10ml （需加入30mL无水乙醇）	4℃或室温
洗脱液 Elution Solution	1ml	4℃或室温

注意:  磁珠溶液使用前要充分震荡，使磁珠冲悬浮均匀，再进行吸取。

其他溶液，如果出现沉淀，需要水浴加热到30度，充分完全溶解后使用。

四．客户自备耗材和试剂

1.       可调移液器（1ml，200ul，20ul），及其枪头，尖底磁力架，适合1.5ml、15mL的离心管。如果需要RNA，枪头和离心管需要用DEPC水处理过。

2.       小型台式离心机

3.       Vortex振荡器

4.       100%乙醇

5.       水浴锅（用于样本裂解）

五．操作步骤

A. 制备试剂

开始实验前，将24mL无水乙醇加入到洗涤液；将30mL无水乙醇加入二次洗涤液中。并混匀，并标记已添加乙醇。

B. 样本裂解

2. 依据下表配比加入。样本体积小于5mL，可以使用15mL离心管，大于体积5mL，可使用50mL的离心管。

试剂	样本体积
样本	1mL	2 mL	4 mL	8 mL
样本裂解液	200uL	400uL	800uL	1600uL

3. vortex震荡30秒，混匀，并98℃沸水浴孵育5~8分钟。

4. 孵育结束，取出放置直至室温。

C．使用磁珠吸附核酸

5. 依照下表比例配置磁珠结合液（磁珠使用前，务必混匀，冲悬浮后再吸取）

试剂	样本体积
样本	1 mL	2mL	4mL	8mL
核酸结合液	1.2 mL	2.5 mL	5mL	10mL
磁珠	15uL	30uL	60uL	120uL

6.       将制备好的磁珠结合液加入离心管中，vortex简短震荡（30秒）并颠倒10次以上充分混匀

7.       中高速摇晃离心管10分钟，促进核酸和磁珠的结合。

8.       将上述离心管置于磁力架上静置5分钟，待馆内溶液澄清，磁珠汇聚于管壁。

9.       小心弃上清（可以使用移液器移出上清液，或者不脱离磁力架倾倒）

D．使用洗涤液清洗

10． 将上述离心管从磁力架取下，加入1mL洗涤液，并震荡重悬浮磁珠。

11. 将悬浮的磁珠溶液转入新1.5mL的离心管中。

12. 将1.5mL重悬浮的磁珠离心管置于1.5mL磁力架静置1分钟，待管内磁珠聚集到管壁。

13. 如果上一步大离心管中有残留的磁珠，可将1.5mL的离心管中的上清液润洗一下上一步中大离心管中的管壁和管盖，将润洗液转移回1.5mL的离心管中。

14. 将上述1.5mL离心管置于磁力架静置2分钟，待管内磁珠澄清且，磁珠聚集管壁。

15. 用移液枪小心弃上清。

16. 将上述1.5mL离心管，取下磁力架，加入1mL洗涤液，并vortex震荡30秒。

17. 将上述1.5mL离心管置于台式小型离心机快速离心，将黏附于关管壁的的残余液体甩至管底，将该离心管置于磁力架静置2分钟，待管内溶液澄清且磁珠聚于管壁。

18. 用移液枪弃上清。

E. 二次洗涤

19. 将1.5mL离心管从磁力架上取下，加入1mL 二次洗涤液，并votex震荡30秒。

20. 将1.5mL离心管置于台式离心机中快速离心，将黏附在管壁上的残液甩到管底，并在磁力架上静置2分钟，待管内溶液澄清且磁珠聚于管壁。

21. 用移液枪弃上清。

22. 重复19~21步骤，对磁珠再次二次洗涤。

23. 将1.5mL离心管从磁力架上取下，并于台式离心机中快速离心，将管壁的残液甩至管底，将该离心管置于磁力架上静置2分钟，待管内溶液澄清，磁珠聚于管壁。

24. 用移液枪弃上清，并小心弃掉底部残留液体。

25. 将1.5mL离心管置于磁力架上开盖3分钟，室温晾干（可根据室内湿度温度情况调节晾干时间，确保乙醇充分挥发，但无需过度干燥磁珠）

F．洗脱核酸

26. 将1.5mL离心管从磁力架上取下，加入核酸洗脱液，建议加入体积依照下表所示：

样本体积	1ml	2mL	4mL	8mL
洗脱液体积	20uL	40uL	80uL	160uL

27. 在vortex上充分震荡，使磁珠重新悬浮，震荡5分钟，将磁珠上吸附的核酸洗脱下来。

28. 将1.5mL离心管置于调试离心机中快速离心，将黏附在管壁和管盖上的液体甩至管底。并将离心管置于磁力架上，待管内溶液澄清且磁珠聚于管壁。

29. 使用DNase和RNase的离心管收集上清液。

30. 收获的核酸产物，可置于4℃冷藏，长期保存需要置于-20℃冷冻保存。

有效期

12个月